Plasmidisolierung
Material
Sie benötigen:
- 20 ml Reagenzgläser mit Alukappe
- LB-Bouillon (Lennox) (Merck, 1.00547.0500)
- Inkubationseinheit zur Züchtung der E. coli Zellen, oder alternativ:
- pUC-haltige E. coli JM109 oder besser DH5-alpha (DSMZ 3424, oder NUGI)
- Ampicillin-Stammlösung: 10 mg Ampicillin-Natriumsalz gelöst in 1 ml Wasser, sterilfiltriert in sterilem Eppendorfreaktionsgefäß. Bei -20°C kann diese Lösung mehrere Wochen aufbewahrt werden.
- Qiagen MiniPrep Kit (50 Reaktionen, 27104)
- automatische 1000 µl und 100 µl Pipetten im Ständer
- dazu passende, sterile blaue und gelbe Pipettenspitzen in Pipettenboxen
- 2 ml Eppendorfreaktionsgefäße
- sterile 1 ml Eppendorfreaktionsgefäße in einem verschlossenen Einweckglas
- Pinzette zum entnehmen der sterilen Eppendorfreaktionsgefäße
- Ethanol in einer Plastikpetrischale zum abflammen der Pinzette und der Kulturgefäße
- Ständer für die Eppendorfreaktionsgefäße
- Tischzentrifuge zum abzentrifugieren von Eppendorfreaktionsgefäßen
- Materialien für eine Agarosegelelektrophorese
Abbildung 1: Plasmidisolierungskit mit Reagenzien
Hier finden Sie eine Übersicht der zu verwendenden Rezepte.