Methoden

Biuret | BCA

Es werden beispielhaft zwei Proteinbestimmungsmethoden vorgestellt. Zum einen die realtiv unempfindliche, "alte", aber robuste Methode der Biuret-Bestimmung und zum anderen die moderne und empfindliche (0,1–1 μg/ml) BCA-Bestimmungsmethode.

Biuret-Reaktion:

• Geben Sie 100 ml 0,2 M NaOH in eine 250 ml-Schraubglasflasche. (0,8 g Natriumhydroxid in 100 ml demin. Wasser entspricht 0,2 M NaOH)
• Lösen Sie folgende Substanzen in der angegebenen Reihenfolge darin:
  • 2,25 g Natriumkaliumtartrat-Tetrahydrat (C4H4KNaO6 x 4 H2O)
  • 0,75 g Kupfersulfat-Pentahydrat (CuSO4 x 5 H2O)
  • 1,25 g Kaliumjodid (IK)
• Füllen Sie diese Lösung mit demin. Wasser auf 250 ml auf.