Protein-Bestimmung

Material

BCA | Biuret | Lowry

Eine englischsprachige Abhandlung über verschiedene Proteinbestimmungsmethoden finden Sie hier.

BCA-Methode

Pierce-Kit 23227:

• mischen Sie 49 Teile Reagenz A mit einem Teil Reagenz B zum fertigen BCA-Reagenz
• Rinderserumalbumin: 2 mg/ml Wasser (im Kit vorhanden)
• Erstellen Sie damit eine Kalibriergrade von 0 - 200 µg Protein/ml
• BCA-Manual (300 K) und Sicherheitsdatenblatt zum Kit (56 K)
  
  
  

Biuret-Methode

• Biuret-Reagenz: Lösen Sie in dieser Reihenfolge 2,25 g Na-K-Tartrat, 0,75 g CuSO4 x 5 H2O, 1,25 g Kaliumjodid in 100 ml 0,2 M NaOH (0,8 g/100 ml). Füllen Sie auf 250 ml Volumen mit destilliertem Wasser auf.
• Rinderserumalbumin-Standardlösung: 10 mg/ml Wasser.
  
  
  

Lowry-Methode

• Setzen Sie folgende Lösungen in bidestilliertem Wasser an:
  Lösung A: 2 % Na2CO3, 0,4 % NaOH, 0,16 % K-Na-Tartrat, 1 % SDS
  Lösung B: 4 % CuSO4 x 5 H2O in Wasser
  Lösung C: ein Teil Lösung B wird mit 100 Teilen Lösung A verdünnt
  Lösung D: Folin-Ciocalteu-Phenol-Reagenz (z.B. von Fluka, 47641) 1:2 mit bidestilliertem Wasser verdünnt (stets frisch ansetzen!)
• Rinderserumalbumin: 5 mg/ml Wasser

Hier finden Sie eine Übersicht der zu verwendenden Rezepte.