Glucose-Bestimmung
Ergebnisse
Ihre Extinktionsmesswerte mit der 2 mM Glucose-Stammlösung und dem Pipettierschema könnten so aussehen:
Tabelle 1: Extinktionswerte bei 365 nm | |||||
0 min | 15 min | delta E15min | 20 min | delta E20min | |
0 µl Glucose | |||||
50 µl Glucose | |||||
150 µl Glucose |
Die Werte in der Spalte "deltaE15min" berechnen sich aus den Messwerten bei 15 min, abzüglich der Messwerte bei 0 min. Die deltaE20min-Werte sind analog berechnet.
Bei kontinuierlicher Registrierung der Messwerte ergibt sich z.B. folgende Darstellung:
Abbildung 1: Glucose-Bestimmung bei 37°C mit kontinuierlicher Registrierung der Extinktionsmesswerte.
Sie können eine ähnliche Kurve auch ohne ein registrierendes Photometer aufzeichnen, in dem Sie alle 30 sec einen Messwert ablesen und diese Daten mit einem Graphikprogramm darstellen.
Die Glucose-Messung verläuft bei Raumtemperatur deutlich langsamer.
Abbildung 2: Glucose-Bestimmung bei Raumtemperatur mit kontinuierlicher Registrierung der Extinktionsmesswerte.
Spezifität der Reaktion
Der Test mit verschiedenen Zuckern als Substrat der Glucose-Bestimmung bzw. Änderungen an sonstigen Testparametern könnte folgende Messergebnisse liefern:
Tabelle 2: Extinktionsmesswerte bei 365 nm nach 20 min Inkubation | |||||
Zucker | E0min | E20min | |||
Galaktose | 0,068 | 0,072 | |||
Fructose | 0,070 | 0,073 | |||
Fructose + Phosphoglucose Isomerase (PGI) | |||||
Glucose + Fructose + PGI | |||||
Lactose | 0,067 | 0,074 | |||
Mannose | 0,073 | 0,075 | |||
Saccharose | 0,069 | 0,076 | |||
ohne Mg2+ | 0,068 | 0,072 | |||
NAD anstelle NADP | 0,071 | 0,078 |