Diskussion

Die Ergebnisse des Aktivitätstestes zeigen, dass die beta-Galaktosidase sowohl o-NPG als auch X-Gal als Substrate umsetzt. Damit haben Sie die biochemische Reaktion des "blau-weiß Screenings" nachgewiesen. Außerdem haben Sie einen direkten Beweis für die Umsetzung eines zweiten Substrates erbracht, was die Unspezifität der beta-Galaktosidase bestätigt.

Die Ergebnisse belegen auch, dass Glucose in vitro (im Reagenzglas) nicht die Umsetzung des o-NPG hemmt. Dies ist ein wichtiger Befund für das Experiment zur beta-Galaktosidase Induktion. Dort werden Sie feststellen, dass Glucose in vivo (in einer E. coli Kultur) die Bildung der beta-Galaktosidase hemmt und so die Umsetzung des Substrates o-NPG verringert wird. Folglich wirkt Glucose in vivo auf die Genregulation und nicht direkt auf die Enzymaktivität.

In diesem Versuch wurde auf die Umsetzung des natürlichen Substrates Lactose (Milchzucker) verzichtet, weil die Produkte dieser Umsetzung (Glucose und Galaktose) farblos sind. Sie können allerdings in Folgeexperimenten die Bildung der Glucose (Galaktose) enzymatisch nachweisen.